Hippocampal Neuronen 4 Puzzle

Verteilung der hippocampal Neuronen, die EGFP vom Förderer Nr4a1/Nur77 (Tg (Nr4a1-EGFP) ausdrücken GY139Gsat, www.gensat.org) in hippocampal CA1 colabelled für den blasenförmigen Glutamattransporter (VGluT1, Rot, Invitrogen polyclonal, 1:1000) und befleckte mit DAPI (blau) um Zellenschichten zu zeigen. EGFP Ausdruck wurde mit dem Anti-GFP Huhn verstärkt (Abcam, 1:2000). Anregende Anschlüsse der Aufkleber VGluT1 auf den Baumgebieten der Pyramidenzellen in der Schicht orien und in Schicht radiatum. Nr4a1-EGFP wird schwer durch Pyramidenzellen CA1 und in geringerem Ausmaß in den Pyramidenzellen CA3 mit spärlichen Zellen im dentate Gyrus ausgedrückt (sehen Sie verbundene Bilder). Abschnitt (40 um, pfeilförmig) wurde mit Fluoromount G und abgebildetes mit einem 32X, 0,4 Ziel Na LD Achroplan auf einem Mikroskop Zeiss Axiovert angebracht. AF568 war bei 562/40 Nanometer und Emission aufgeregt, die bei 624/40 Nanometer mit Semrock Filtern und einem Singleband, das gesammelt wurde dichroik ist (530-585 Nanometer reflektiert, 601-800 Nanometer übertragen). AF488 war bei 482/35 Nanometer und Emission aufgeregt, die bei 536/40 Nanometer mit Semrock Filtern und einem Singleband, das gesammelt wurde dichroik ist (446-499 Nanometer reflektiert, 513-735 Nanometer übertragen). DAPI war bei 350/50 Nanometer und Emission aufgeregt, die bei 460/50 Nanometer mit einem dichroiken CLP400 gesammelt wurde (Farbenreinheit). Singlebilder wurden für jeden Kanal unter Verwendung Zeiss Axiocam HERRN CCD und Pseudo-farbiges unter Verwendung Axiovision gefangen genommen. Linearer Hintergrundabzug wurde auf dem dargestellten Bild verwendet. Sehen Sie Davis und Puhl (2011), Pubmed Identifikation 21305052, für ein ausführliches befleckendes Protokoll und Bilder von EGFP Ausdruck im striatum und im Amygdala in dieser Belastung. Dieses Bild ist ein Teil einer Reihe, die EGFP Ausdruck vom Förderer Nr4a1 während des Gehirns kennzeichnet.